發(fā)光免疫分析是一種靈敏度高、特異性強、檢測快速及無放射危害的分析技術(shù)。70年代末以來得到了迅速發(fā)展，目前在國際上已經(jīng)實現(xiàn)商品化和產(chǎn)業(yè)化的發(fā)光免疫分析產(chǎn)品，基本上可以分為：化學發(fā)光、時間分辨熒光(也稱時間延遲光致發(fā)光)、電化學發(fā)光(也稱場致發(fā)光和電致發(fā)光)幾種。下面生化清洗液小編就為您帶來介紹。
1、化學發(fā)光
化學發(fā)光是指在化學反應過程中發(fā)出可見光的現(xiàn)象。通常是指有些化合物不經(jīng)紫外光或可見光照射，通過吸收化學能(主要為氧化還原反應)，從基態(tài)激發(fā)至激發(fā)態(tài)。退激時通過躍遷(或?qū)⒓ぐl(fā)能轉(zhuǎn)移至受體分子上)，釋放能量產(chǎn)生光子，以光形式放出能量從而導致的發(fā)光現(xiàn)象。其主要特點為消耗發(fā)光劑。同時量子效率相對較低。
1.1 按化學反應類型分類：可分為酶促化學發(fā)光和非酶促化學發(fā)光兩類。其中酶促化學發(fā)光主要包括辣根過氧化物酶(HRP)系統(tǒng)、堿性磷酸酶 (ALP)系統(tǒng)、黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)等。酶促發(fā)光的共同特點為發(fā)光過程中作為標記物的酶基本不被消耗，而反應體系中發(fā)光劑充分過最，因此發(fā)光信號強而穩(wěn)定，且發(fā)光時間較長。因此可采用速率法測量，故檢測方式簡單、成本較低。酶促反應的主要缺點為工作曲線可能隨時間漂移，而且低端斜率容易呈非線性下移。而非酶促化學發(fā)光包括吖啶酯系統(tǒng)、草酸酯系統(tǒng)、三價鐵一魯米諾系統(tǒng)等。非酶促發(fā)光的共同特點為發(fā)光過程中標記物被消耗，同時作為標記物的發(fā)光劑是發(fā)光反應的瓶頸，即含量總是相對不足，因此發(fā)光信號持續(xù)時間較短；如果直接在免疫反應杯中啟動發(fā)光反應，由于發(fā)光劑被很快消耗，故只能進行一次性測量。所以重復性較差。為降低檢測成本并實現(xiàn)重復測量，目前普遍采用原位進樣加流動池的時間積分測量方式。因此儀器成本及維護費用較高，而且反復使用的流動池可能導致交叉污染；并目沖洗或進樣中產(chǎn)生的氣泡也會干擾測定；同時繁瑣冗長的沖洗過程也會成為提高檢測效率的瓶頸。另外，使用磁性或非磁性微粒時，強烈的散射吸收作用也會降低靈敏度。
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